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本文文章來源:輔必成(上海)醫(yī)藥科技有限公司 作者:限掌
在乳劑的分析檢測中,經(jīng)常會(huì)用到蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD),其zui大的優(yōu)越性在于能檢測不含發(fā)色團(tuán)的化合物,如:碳水化合物、磷脂、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物等。因?yàn)镋LSD的響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)特性,任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測,不受其官能團(tuán)的影響,他的多用途與高性能與RID(示差折光檢測器)相比,優(yōu)勢(shì)如下:
檢測器類型
ELSD
RID
原理
光散射
折射率
靈敏度
高
低
環(huán)境溫度影響
不敏感
敏感
梯度洗脫
可以
不可以
溶劑峰干擾
受溶劑峰干擾
溶劑無響應(yīng),無溶劑峰

重點(diǎn)來了,每個(gè)儀器都有自身的優(yōu)缺點(diǎn),ELSD也不例外。在ELSD的使用的過程中,遇到過一些五花八門的問題。羅列如下:
1.改變漂移管溫度后儀器的響應(yīng)不一樣
溫度太低,基線水平較高,流動(dòng)相得不到充分揮發(fā);溫度太高,會(huì)使流動(dòng)相沸騰,反而增加背景噪聲,同時(shí)還有可能導(dǎo)致被測樣品的部分揮發(fā),降低信噪比。zui優(yōu)的溫度應(yīng)為流動(dòng)相基本揮發(fā)基礎(chǔ)上,產(chǎn)生可接受噪音的zui低溫度。
2.改變載氣流速后儀器的響應(yīng)不一樣
其它條件不變的情況下,載氣流速越小,形成的物質(zhì)粒子半徑越大,對(duì)激光的散射能力越強(qiáng),相應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)越大,zui優(yōu)的載氣流速應(yīng)為可接受噪音基礎(chǔ)上并且產(chǎn)生較高響應(yīng)的zui低流速。
3.儀器一直顯示未就緒狀態(tài)
不同溶劑的揮發(fā)性不同,儀器較長時(shí)間保存在易揮發(fā)的溶劑中,由于溶劑的揮發(fā)而導(dǎo)致液相的脫氣機(jī)真空不夠而儀器一直顯示未就緒狀態(tài)。遇到這種情況后要先更換揮發(fā)性較低的溶劑(如異丙醇)對(duì)儀器的每個(gè)管路分別Purge 10分鐘以上,然后儀器的噪音會(huì)逐漸降低,軟件也會(huì)由未就緒變成空閑狀態(tài)。然后就可以更換需要的流動(dòng)相進(jìn)行平衡。
4.儀器的基線很亂,無規(guī)律狀態(tài),噪聲范圍很大
這種情況多半是漂移管污染了,需要對(duì)漂移管進(jìn)行清洗。按照儀器說明書的操作用適合的工具拆開儀器,用專用的清理刷使用乙醇和清水進(jìn)行清洗。
5.序列太長時(shí),同一樣品在序列前后的峰面積差異較大
遇到這種情況就要考慮同一序列中需要排的樣品數(shù)了。分析原因,可能是流動(dòng)相組成中不同成分的揮發(fā)性不一致,導(dǎo)致運(yùn)行到后面的流動(dòng)相中不同組分的比例發(fā)生變化,出峰情況也就不一樣了;還有可能在運(yùn)行的過程中樣品顆粒有少量殘留在儀器中沒有排出而導(dǎo)致后面的樣品面積增大。使用ELSD檢測時(shí),可減少同一序列的樣品數(shù)量,檢測的數(shù)量少了,相對(duì)儀器的負(fù)擔(dān)也會(huì)減少,維護(hù)起來也方便。
使用中注意事項(xiàng):
1.流動(dòng)相的揮發(fā)性一定要低于被測樣品,這樣才不會(huì)有溶劑的干擾。
2.ELSD使用前要先通氣,再升溫,zui后再進(jìn)流動(dòng)相,使用后要先停流動(dòng)相,再降溫,zui后停氣。
3.可以選擇高溫(110℃),通氣(流速根據(jù)使用人的情況來定)的條件進(jìn)行清洗系統(tǒng),沖洗的流動(dòng)相可以選擇水、甲醇或異丙醇。
